Τροποποίηση Φωσφορυλίωσης
Η έρευνα για τις φωσφορυλιωμένες πρωτεΐνες και τα πεπτίδια μπορεί να βοηθήσει τους ανθρώπους να αποσαφηνίσουν τον μηχανισμό της παραπάνω διαδικασίας και να κατανοήσουν περαιτέρω τη φύση των δραστηριοτήτων της ζωής. Τα τελευταία χρόνια, με τη συνεχή ανάπτυξη της τεχνολογίας πρωτεϊνικής, η μελέτη της φωσφορυλίωσης των πρωτεϊνών έχει λάβει όλο και μεγαλύτερη προσοχή. Πολλές φυσικές τοξίνες και παθογόνα ασκούν επίσης τα αποτελέσματά τους αλλάζοντας την κατάσταση φωσφορυλίωσης των ενδοκυτταρικών πρωτεϊνών.
Τα φωσφορυλιωμένα πολυπεπτίδια αναφέρονται κυρίως στα Ser, Tyr και Thr. Η υδροξυλική ομάδα πλευρικής αλυσίδας του υπολείμματος τροποποιείται σε ένα όξινο φωσφορικό πολυπεπτίδιο. Μέχρι στιγμής, η τροποποίηση φωσφορυλίωσης πολυπεπτιδίων περιλαμβάνει κυρίως τη μέθοδο μετα-φωσφορυλίωσης και δύο μεθόδους σύνθεσης:
Όταν τροποποιείται με τη μέθοδο του μονομερούς, το φωσφορυλιωμένο αμινοξύ είναι δύσκολο να συμπυκνωθεί με την πεπτιδική αλυσίδα λόγω της στερικής παρεμπόδισης που προκαλείται από την ομάδα τροποποίησης της μεγαλύτερης πλευρικής αλυσίδας και η επακόλουθη εισαγωγή αμινοξέος θα είναι πιο δύσκολη. Ειδικά όταν περιέχει πολλαπλές τροποποιήσεις θέσεων φωσφορυλίωσης, η σύνθεση θα γίνει εξαιρετικά δύσκολη και το τελικό προϊόν έχει πολύπλοκα συστατικά, είναι δύσκολο να διαχωριστεί και έχει εξαιρετικά χαμηλή απόδοση. Επομένως, όταν πολλές θέσεις στην πεπτιδική αλυσίδα φωσφορυλιώνονται, μπορεί να ληφθεί υπόψη η μέθοδος μετά-φωσφορυλίωσης. Η κύρια διαδικασία σύνθεσης είναι η επιλεκτική αφαίρεση των προστατευτικών ομάδων πλευρικής αλυσίδας των αμινοξέων που θα επισημανθούν μετά την ολοκλήρωση της σύνθεσης πολυπεπτιδίου. Για το Tyr, τα αμινοξέα Thr με μη προστατευμένες πλευρικές αλυσίδες μπορούν να χρησιμοποιηθούν απευθείας για την αντίδραση. Προστατευτική ομάδα πλευρικής αλυσίδας σε 1% TFA/DCM Μπορεί να αφαιρεθεί ποσοτικά υπό ορισμένες συνθήκες. Κατά τη διάρκεια της μετά{8}}φωσφορυλίωσης, μπορεί να χρησιμοποιηθεί διβενζυλοφωσφοραμιδίτης. Η τετραζόλη δημιουργεί το ενεργό ενδιάμεσο φωσφοραμιδίτη τετραζόλης, το οποίο συνδέεται με την ομάδα υδροξυλίου και στη συνέχεια οξειδώνεται υπό συνθήκες υπεροξυοξέος για να δημιουργήσει μια φωσφορυλική ομάδα για να ολοκληρωθεί η αντίδραση.
- Παρέχουμε υπηρεσίες τροποποίησης pSer, pTyr, pThr και D-pSer, D-pTyr, D-pThr Phosphorylation.
- Τροποποιήσεις φωσφορυλίωσης 2 θέσεων, 3 θέσεων, 4 θέσεων και 5 θέσεων μπορούν να πραγματοποιηθούν ταυτόχρονα.
Φωσφορυλιωμένα πεπτίδια Συνθετική περίπτωση (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) αναμονή)
1. Υπάρχουν 4 θέσεις φωσφορυλίωσης στην αλληλουχία (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), η καθαρότητα είναι 95% και ο κύκλος ολοκλήρωσης είναι 3 εβδομάδες.
